NEST
尝试时刻
软琼脂克隆尝试
软琼脂克隆形成别名非锚定依赖性成长尝试(Anehorage-independentassay），利用软琼脂为造就介质，使细胞在悬浮状态下成长。
软琼脂克隆形成尝试步骤单一，合用于贴壁成长的细胞。
细胞克隆形成率暗示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量，重要反映细胞群体依赖性和增殖能力两个沉要性状。
Part 01.
尝试资料
Part 02.
尝试操作流程
常见问题与解答
A：细胞接种密杜纂最终尝试了局亲昵有关，若细胞太多，形成克隆数量太多，处置了局时数克隆不仅容易犯错，并且图片很难看（下图左）。细胞太少，不能形成克隆。如下图所示：
上图我们看到3株癌细胞在6孔板克隆形成图片，第一个显著铺板细胞太密集，导致难以统计数据；中央那个正好，最后面那个细胞数量偏少，且细胞铺板不均匀。因而，为了获得美观的图片和正确的数据，第一次尝试最好设置细胞接种梯度，如500-1000-2000-5000个/孔遴选出最相宜的接种密度。细胞在进行克隆形成尝试时要求有95%以上的分散度，不然了局的正确度会受到很大影响；另表把稳细胞计数时建议多计数几次。
A：并非每种细胞都能够形成克隆，克隆形成率与细胞自身增殖能力有关；褂虢又窒赴芏，参与造就液的体积、血清浓杜仔关。因该尝试处置功夫较长，应给细胞多加造就基，如每孔4ml，或者3天更换一次造就基，以供给细胞充足的营养。
END
